Comment puis-je augmenter la profondeur de champ lorsque je photographie au microscope?

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Je photographiais un petit coléoptère et je suis tombé sur le problème qu'il ne faisait que 0,5 pouces de long, et le réglage de la macro sur mon appareil photo n'a pas produit une image suffisamment détaillée et nette. J'ai donc placé le scarabée sous un microscope à grossissement 5 ×. Cependant, le plan focal n'était pas aussi épais que le scarabée. Par conséquent, je ne pouvais que mettre au point les pieds ou la tête / le haut, mais pas les deux:

pieds au point tête au point

Comment le scarabée peut-il être photographié entièrement au point à travers la portée 5 ×?

macro focus microscopy

— Vallée
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Hmmm .... Tu portes des bottes?

— Veuillez lire mon profil

En passant de plaisanter à être très pédant, notez qu'il y a une différence technique entre la profondeur de champ et la profondeur de champ , et bien que cela n'ait aucune importance pour la réponse pratique à votre question, c'est en fait la profondeur de champ que vous demandez.

— Veuillez lire mon profil

Les termes semblent contre-intuitifs.

— Dale

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Vous pouvez utiliser l' empilement de focus . C'est un moyen de combiner des images similaires à une DOF inférieure pour créer une image de DOF plus grande. Cette vidéo détaille la procédure.

— Sridhar Iyer
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Aussi plus d'informations dans cette question: photo.stackexchange.com/questions/667/…

— Maynard Case

Notez que pour l'empilement du focus, le scarabée devrait également être immobilisé, peut-être mort.

— James Snell

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Faites-les sauter dans le congélateur pendant un court instant, ne tuez pas et ils cessent de bouger jusqu'à ce qu'ils se réchauffent à nouveau. Et +1 pour l'empilement de focus, tellement de plaisir.

— Patrick Hughes

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La profondeur de champ est fonction de la relation entre le grossissement de l'image et l'ouverture du diaphragme (ouverture).

Vous devrez réduire l'ouverture à ce grossissement ou réduire le grossissement à cette ouverture.

Changer la distance focale de l'objectif pour affecter le dof à partir d'une distance sujet-appareil photo modifie en fait le grossissement de l'image.

** Une façon de réduire l'ouverture, si le microscope a une ouverture fixe, est d'utiliser un "arrêt de champ".

Pour faire un arrêt sur le terrain, coupez / ou percez un trou circulaire propre dans un papier rigide opaque (le noir est préférable) ou une carte mince. Vous pouvez également utiliser un Sharpie ou de l'encre de Chine pour rendre une fiche suffisamment noire. Peut-être que vous pouvez trouver la rondelle de métal ou de fibre de bonne taille dans une quincaillerie ou autre. pièces que vous avez peut-être déjà autour de votre studio, laboratoire, magasin ou maison - peignez-le en noir pour réduire les reflets. Collez-le en place sur l'objectif.

Placez votre ouverture devant l'objectif du microscope en centrant l'ouverture. Pour certains oscilloscopes à faible grossissement et à échantillon grossier, cela est relativement facile car l'objectif est assez grand.

La butée de champ agit comme une ouverture extérieure pour limiter la lumière entrant dans l'objectif au centre. L'effet est une profondeur apparente accrue en raison de «l'arrêt» (réduction de l'ouverture) de l'objectif.

Expérimentez pour trouver la bonne ouverture pour atteindre la profondeur de champ que vous souhaitez. L'exposition devra compenser la réduction de la lumière. Il peut y avoir du vignettage, mais c'est la vie.

L'arrière-plan peut également être un peu plus clair, ce qui peut aider au rendu des détails de l'image.

— Stan
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La profondeur de champ est basée sur la distance de visualisation et le grossissement. Vous pouvez réduire la taille de l'ouverture à travers laquelle la lumière se déplace, mais cela devrait être fait en utilisant différentes optiques dans le microscope lui-même. Je ne pense pas que la plupart des microscopes disposent d'un réglage de profondeur de champ.

L'empilement de la mise au point est l'autre option qui fonctionne essentiellement en prenant plusieurs images et en utilisant les zones les plus nettes de chacune. Cela nécessite cependant que le sujet soit immobile pour ne pas fonctionner sur des sujets en direct.

Un calculateur de profondeur de champ de microscopie en ligne est disponible ici .

— AJ Henderson
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dans le contexte de l'imagerie microscopique et de la macrophotographie, la formule est différente. Mais un facteur demeure, que vous avez omis: l'ouverture. Cependant, la distance et la distance focale ont disparu. Ce qui compte, c'est le CoC, le grossissement, l'ouverture et le rapport pupille d'entrée / sortie.

— Michael Nielsen

Le grossissement ne remplace pas la distance focale. Je pensais qu'il y avait des microscopes qui vous permettaient de modifier la distance par rapport à la lame, mais ce n'est peut-être qu'un mécanisme de mise au point. Je ne pensais pas que les microscopes avaient une ouverture variable, mais je pouvais me tromper à ce sujet. Ma connaissance des microscopes est assez limitée.

— AJ Henderson